微生物實(shí)驗(yàn)室是生物學(xué)領(lǐng)域必備實(shí)驗(yàn)室。如何配置才能成就一個(gè)完備的微生物實(shí)驗(yàn)室,哪些儀器必不可少,哪些儀器可有可無(wú)?
(1)超凈工作臺(tái)
微生物的培養(yǎng)都是在特定培養(yǎng)基中進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng),那么無(wú)菌培養(yǎng)必然需要超凈工作臺(tái)提供一個(gè)無(wú)菌的工作環(huán)境。超凈工作臺(tái)的用途是微生物的接種及處理時(shí)的無(wú)菌操作。
(2)培養(yǎng)箱
培養(yǎng)箱有多種類型,它的作用在于為微生物的生長(zhǎng)提供一個(gè)適宜的環(huán)境。 培養(yǎng)箱有多種類型,包括生化培養(yǎng)箱,霉菌培養(yǎng)箱,厭氧培養(yǎng)箱等。具體來(lái)說(shuō)區(qū)別如下: a. 生化培養(yǎng)箱只能控制溫度。可作為一般細(xì)菌的平板培養(yǎng)。 b. 霉菌培養(yǎng)箱可以控制溫度和濕度??勺鳛槊咕呐囵B(yǎng)。 c. CO2培養(yǎng)箱適用于厭氧微生物的培養(yǎng),例如雙歧桿菌。
(3)天平
天平用于精確稱量各類試劑。實(shí)驗(yàn)室常用的是電子天平,電子天平按照精度不同有不同的級(jí)別。
(4)微生物均質(zhì)器
用于從固體樣品中提取細(xì)菌。用微生物均質(zhì)器制備微生物檢測(cè)樣本具有樣品無(wú)污染、無(wú)損傷、不升溫、不需要滅菌處理,不需洗刷器皿等特點(diǎn),是微生物實(shí)驗(yàn)中使用較為方便的儀器。
(5)菌落計(jì)數(shù)器
菌落計(jì)數(shù)儀可協(xié)助操作者計(jì)數(shù)菌落數(shù)量。通過(guò)放大,拍照,計(jì)數(shù)等方式準(zhǔn)確的獲取菌落的數(shù)量。有些高性能的菌落計(jì)數(shù)器還可連接電腦完成自動(dòng)計(jì)數(shù)的操作。
(6)微波爐/電爐
用于溶液的快速加熱,微生物固體培養(yǎng)基的加熱溶化。
(7)高壓滅菌鍋
(7)高壓滅菌鍋
微生物學(xué)所用到的大部分實(shí)驗(yàn)物品、試劑、培養(yǎng)基都應(yīng)嚴(yán)格消毒滅菌。滅菌鍋也有不同大小型號(hào),有些是手動(dòng)的,有些是全自動(dòng)的。用戶需要根據(jù)自己的需要選購(gòu)。
(8)移液器
液體量器用于精密量取各類液體。常見的液體量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度試管、燒杯。
(9)冰箱
冰箱是實(shí)驗(yàn)室保存試劑和樣品必不可少的儀器。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中用到的試劑有些要求是4度保存,有些要求是負(fù)20度保存,實(shí)驗(yàn)人員一定要看清試劑的保存條件,放置在恰當(dāng)?shù)臏囟认卤4?。具體來(lái)說(shuō),不同溫度下保存的物品如下: a. 4℃適合儲(chǔ)存某些溶液、試劑、藥品等。 b. -20℃適用于某些試劑、藥品、配好的抗生素等。 c. -80℃適合某些長(zhǎng)期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種、感受態(tài)等的保存。
(10)生物安全柜
微生物實(shí)驗(yàn)中涉及的試劑和樣品微生物有些是有毒的,對(duì)于操作人員來(lái)說(shuō)傷害較大。為了防止有害懸浮微粒、氣溶膠的擴(kuò)散,可以利用生物安全柜對(duì)操作人員、樣品及樣品間交叉感染和環(huán)境提供安全保護(hù)。
(11)搖床
(11)搖床
搖床是實(shí)驗(yàn)室常用的一種儀器,在微生物實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中,液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要在特定溫度下振蕩使用。
(12)純水裝置
純水裝置包括蒸餾水器和純水機(jī)。蒸餾水器的價(jià)格便宜,但在造水過(guò)程中需要有人值守;純水機(jī)價(jià)格高些,但是使用方便,可以儲(chǔ)存一定量的純水。純水使用也有不同的級(jí)別,實(shí)驗(yàn)中配制試劑,配制培養(yǎng)基均需用純水。
(13)生物顯微鏡
由于微生物體積較小,所以在觀察時(shí)需要借助生物顯微鏡。生物顯微鏡用于微生物和微小物品結(jié)構(gòu),形態(tài)等的觀察。
(14)冷凍干燥機(jī)
(14)冷凍干燥機(jī)
主要適用于細(xì)菌、微生物、酵母等的干燥。用于干燥保存易脫水的產(chǎn)品,在加水以后能夠再次恢復(fù)原材料的特性,不影響其生物活性等。通過(guò)冷凍干燥,細(xì)菌之類的材料成為干燥狀態(tài),從而不會(huì)發(fā)生化學(xué)改變。
(15)分光光度計(jì)
分光光度計(jì)在微生物試驗(yàn)中用于測(cè)定微生物懸液的濃度,可以正確選取合適的培養(yǎng)時(shí)間。一般是在600nm波長(zhǎng)測(cè)定菌液濃度。
(16)恒溫干燥箱
恒溫干燥箱是用于滅菌和洗滌后的物品烘干。烘箱有不同的控溫范圍,用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行選擇。例如,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進(jìn)行烘干,一般玻璃用具的烘干可以選擇60℃。
(17)恒溫水浴鍋
水浴鍋是一種控溫裝置,水浴控溫對(duì)于樣品來(lái)說(shuō)比較快速且接觸充分。有些微生物反應(yīng)需要在37度,42度,56度下水浴進(jìn)行,所以恒溫水浴鍋可以提供需要的溫度。
(18)酸度計(jì)
用于配置試劑時(shí)精確測(cè)量PH值,從而保證配置的溶液的精確性。有時(shí)也需要利用pH計(jì)測(cè)定樣品溶液的酸堿度。
(19)離心機(jī)
用于收集微生物菌體以及其他沉淀物。離心機(jī)有冷凍和常溫之分。有些樣品由于在常溫下不太穩(wěn)定,需要低溫環(huán)境,要視樣品的種類而定。
(20)液氮罐
液氮罐儲(chǔ)存液氮,可用于細(xì)菌、酵母、霉菌和大型真菌等各種微生物的長(zhǎng)期保存。以上介紹的是微生物實(shí)驗(yàn)室的基本儀器配置,在組建實(shí)驗(yàn)室時(shí)還需要其他一些耗材,例如酒精燈,試管架,三角瓶,量筒,玻璃試管,滅菌吸管,涼干架,剪刀,鑷子,脫脂棉,紗布,試管筐,無(wú)菌采樣及稱樣袋,接種環(huán),過(guò)濾器等。實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)自己的需求為微生物實(shí)驗(yàn)室配置合適的儀器和耗材。
微生物實(shí)驗(yàn)室管理制度
一、實(shí)驗(yàn)室管理制度
1.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定儀器配備管理、使用制度,藥品管理、使用制度,玻璃器皿管理、使用制度,并根據(jù)安全制度和環(huán)境條件的要求,本室工作人員應(yīng)嚴(yán)格掌握,認(rèn)真執(zhí)行。
2.進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須穿工作服,進(jìn)入無(wú)菌室換無(wú)菌衣、帽、鞋,戴好口罩,非實(shí)驗(yàn)室人員不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,嚴(yán)格執(zhí)行安全操作規(guī)程。
3.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)物品擺放整齊,試劑定期檢查并有明晰標(biāo)簽,儀器定期檢查、保養(yǎng)、檢修, 嚴(yán)禁在冰箱內(nèi)存放和加工私人食品。
4.各種器材應(yīng)建立請(qǐng)領(lǐng)消耗記錄,貴重儀器有使用記錄,破損遺失應(yīng)填寫報(bào)告;藥品、器材、菌種不經(jīng)批準(zhǔn)不得擅自外借和轉(zhuǎn)讓,更不得私自拿出。
5.禁止在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吸煙、進(jìn)餐、會(huì)客、喧嘩,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不得帶入私人物品,離開實(shí)驗(yàn)室前認(rèn)真檢查水電,對(duì)于有毒、有害、易燃、污染、腐蝕的物品和廢棄物品應(yīng)按有關(guān)要求執(zhí)行。
6.負(fù)責(zé)人嚴(yán)格執(zhí)行本制度,出現(xiàn)問(wèn)題立即報(bào)告,造成病原擴(kuò)散等責(zé)任事故者,應(yīng)視情節(jié)直至追究法律責(zé)任。
二、儀器配備、管理使用制度
二、儀器配備、管理使用制度
1.食品微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備下列儀器:培養(yǎng)箱、高壓鍋、普通冰箱、低溫冰箱、厭氧培養(yǎng)設(shè)備、顯微鏡、離心機(jī)、超凈臺(tái)、振蕩器、普通天平、千分之一天平、烤箱、冷凍干燥設(shè)備、勻質(zhì)器、恒溫水浴箱、菌落計(jì)數(shù)器、生化培養(yǎng)箱,電位 pH計(jì)、高速離心機(jī)。
2.實(shí)驗(yàn)室所使用的儀器、容器應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)要求,保證準(zhǔn)確可靠,凡計(jì)量器具須經(jīng)計(jì)量部門檢定合格方能使用。
3.實(shí)驗(yàn)室儀器安放合理,貴重儀器有專人保管,建立儀器檔案,并備有操作方法,保養(yǎng)、維修、說(shuō)明書及使用登記本,做到經(jīng)常維護(hù)、保養(yǎng)和檢查,精密儀器不得隨意移動(dòng),若有損壞需要修理時(shí),不得私自拆動(dòng)、應(yīng)寫出報(bào)告、通知管理人員,由經(jīng)理同意填報(bào)修理申請(qǐng)、送儀器維修部門。
4.各種儀器(冰箱、溫箱除外),使用完畢后要立即切斷電源,旋鈕復(fù)原歸位,待仔細(xì)檢查后,方可離去。
5.一切儀器設(shè)備未經(jīng)設(shè)備管理人員同意,不得外借,使用后按登記本的內(nèi)容進(jìn)行登記。
6.儀器設(shè)備應(yīng)保持清潔,一般應(yīng)有儀器套罩。
7.使用儀器時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行,對(duì)違反操作規(guī)程的因管理不善致使儀器械損壞,要追究當(dāng)事者責(zé)任。
三、藥品管理、使用制度
1.依據(jù)本室檢測(cè)任務(wù),制定各種藥品試劑采購(gòu)計(jì)劃,寫清品名、單位、數(shù)量、純度、包裝規(guī)格,出廠日期等,領(lǐng)回后建立賬目,專人管理,每半年做出消耗表,并清點(diǎn)剩余藥品。
2.藥品試劑陳列整齊,放置有序、避光、防潮、通風(fēng)干燥,瓶簽完整,劇毒藥品加鎖存放、易燃、揮發(fā)、腐蝕品種單獨(dú)貯存。
3.領(lǐng)用藥品試劑,需填寫請(qǐng)領(lǐng)單、由使用人和室負(fù)責(zé)人簽字,任何人無(wú)權(quán)私自出借或饋送藥品試劑,本單位科、室間或外單位互借時(shí)需經(jīng)科室負(fù)責(zé)人簽字。
4.稱取藥品試劑應(yīng)按操作規(guī)范進(jìn)行,用后蓋好,必要時(shí)可封口或黑紙包裹,不使用過(guò)期或變質(zhì)藥品。
四、玻璃器皿管理、使用制度
1.根據(jù)測(cè)試項(xiàng)目的要求,申報(bào)玻璃儀器的采購(gòu)計(jì)劃、詳細(xì)注明規(guī)格、產(chǎn)地、數(shù)量、要求,硬質(zhì)中性玻璃儀器應(yīng)經(jīng)計(jì)量驗(yàn)證合格。
2.大型器皿建立賬目,每年清查一次,一般低值易耗器皿損壞后隨時(shí)填寫損耗登記清單。
3.玻璃器皿使用前應(yīng)除去污垢,并用清潔液或2%稀鹽酸溶液浸泡24 h后,用清水沖洗干凈備用。
4.器皿使用后隨時(shí)清洗,染菌后應(yīng)嚴(yán)格高壓滅菌,不得亂棄亂扔。
五、安全制度
五、安全制度
1.進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作衣、帽、鞋必須穿戴整齊。
2.在進(jìn)行高壓、干燥、消毒等工作時(shí),工作人員不得擅自離現(xiàn)場(chǎng),認(rèn)真觀察溫度、時(shí)間,蒸餾易揮發(fā)、易燃液體時(shí),不準(zhǔn)直接加熱,應(yīng)置水浴鍋上進(jìn)行,試驗(yàn)過(guò)程中如產(chǎn)生毒氣時(shí)應(yīng)在避毒柜內(nèi)操作。
3.嚴(yán)禁用口直接吸取藥品和菌液,按無(wú)菌操作進(jìn)行,如發(fā)生菌液、病原體濺出容器外時(shí),應(yīng)立即用有效消毒劑進(jìn)行徹底消毒,安全處理后方可離開現(xiàn)場(chǎng)。
4.工作完畢,兩手用清水肥皂洗凈,必要時(shí)可用新潔爾滅、過(guò)氧乙酸泡手,然后用水沖洗,工作服應(yīng)經(jīng)常清洗,保持整潔,必要時(shí)高壓消毒。
5.實(shí)驗(yàn)完畢,即時(shí)清理現(xiàn)場(chǎng)和實(shí)驗(yàn)用具,對(duì)染菌帶毒物品,進(jìn)行消毒滅菌處理。6.每日下班,尤其節(jié)假日前后認(rèn)真檢查水、電和正在使用的儀器設(shè)備,關(guān)好門窗,方可離去。
六、環(huán)境條件要求
1.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)要經(jīng)常保持清潔衛(wèi)生,每天上下班應(yīng)進(jìn)行清掃整理,桌柜等表面應(yīng)每天用消毒液擦拭,保持無(wú)塵,杜絕污染。2.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)井然有序,不得存放實(shí)驗(yàn)室外及個(gè)人物品、儀器等,實(shí)驗(yàn)室用品要擺放合理,并有固定位置。
3.隨時(shí)保持實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生,不得亂扔紙屑等雜物,測(cè)試用過(guò)的廢棄物要倒在固定的箱筒內(nèi),并及時(shí)處理。
4.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有優(yōu)良的采光條件和照明設(shè)備。
5.實(shí)驗(yàn)室工作臺(tái)面應(yīng)保持水平和無(wú)滲漏,墻壁和地面應(yīng)當(dāng)光滑和容易清洗。
6.實(shí)驗(yàn)室布局要合理,一般實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有準(zhǔn)備間和無(wú)菌室,無(wú)菌室應(yīng)有良好的通風(fēng)條件,如安裝空調(diào)設(shè)備及過(guò)濾設(shè)備,無(wú)菌室內(nèi)空氣測(cè)試應(yīng)基本達(dá)到無(wú)菌。
7.嚴(yán)禁利用實(shí)驗(yàn)室作會(huì)議室及其他文娛活動(dòng)和學(xué)習(xí)場(chǎng)所。
微生物實(shí)驗(yàn)操作中注意事項(xiàng)
1.由被檢驗(yàn)標(biāo)本或培養(yǎng)物中取材觀察細(xì)菌形態(tài)時(shí),必須使用接種環(huán)。接種環(huán)系采用一段長(zhǎng)約5 ~8cm 硬度適中的鎳質(zhì)電阻絲或特制鉑絲,安置在一金屬或玻璃棒上制成。無(wú)環(huán)者則稱接種針。
2.接種環(huán)或接種針每次使用前后,均須火焰滅菌。即在乙醇燈火焰上徹底燒灼1 次,金屬棒或玻璃棒部分亦須轉(zhuǎn)動(dòng)著通過(guò)火焰3 次,用后燒灼時(shí),先將近環(huán)處鎳絲置于火焰中,使熱導(dǎo)向接種環(huán),如直接將環(huán)燒灼,則環(huán)上殘余菌液可因突然受高熱而爆烈四濺,有傳染危險(xiǎn)。待環(huán)上菌液蒸發(fā)干涸后,再將接種環(huán)以垂直方向于火焰中燒灼滅菌,后再將金屬棒或玻璃棒部分往復(fù)通過(guò)火焰。接種針用后滅菌時(shí)與接種環(huán)同。
3.接種環(huán)(針)經(jīng)火焰后,需待冷卻后再沾取標(biāo)本或放置于工作臺(tái)上,以防燙死微生物和燒損桌面。
4.由培養(yǎng)基或試管培養(yǎng)物中沾取標(biāo)本時(shí),培養(yǎng)瓶口、試管口在打開后及關(guān)閉前,應(yīng)于火焰上通過(guò)1 ~2 次,以殺死可能從空氣中落入的雜菌和由培養(yǎng)物而來(lái)的致病菌。打開瓶塞或試管塞時(shí),應(yīng)將棉塞上端夾于手指間適當(dāng)?shù)奈恢茫坏脤⒚奕我夥胖脛e處。
5.不染色標(biāo)本和染色標(biāo)本觀察后,應(yīng)立即投入消毒液內(nèi)滅菌。
6.使用過(guò)玻片,務(wù)須徹底消除玻片上的染色細(xì)菌后再用,否則再次使用時(shí)可能做出錯(cuò)誤診斷。
舉例:一般藥廠的微生物實(shí)驗(yàn)室如何配置?
1.環(huán)境按藥典要求限度實(shí)驗(yàn)室,室內(nèi)環(huán)境應(yīng)為萬(wàn)級(jí)局部為百級(jí)。那么得需要建立一個(gè)萬(wàn)級(jí)的潔凈區(qū),這是必須的,那么局部百級(jí)的話,可以通過(guò)百級(jí)層流臺(tái)來(lái)實(shí)現(xiàn)。
2 進(jìn)行限度實(shí)驗(yàn)和陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)的話,用到菌種,進(jìn)行菌種保藏的相關(guān)設(shè)施。如冰箱,玻璃管,接種環(huán),試管架等需齊備。
3 就是稀釋時(shí),需要移液槍,配上各種規(guī)格的吸量管等。
4 限度實(shí)驗(yàn)一般是要做革蘭氏染色的,準(zhǔn)備一臺(tái)顯微鏡(光學(xué)鏡即可)及相關(guān)設(shè)備。
5 既然涉及到菌種了,那么滅菌就是必須得了。如果用量小的話,那么一個(gè)小的滅菌鍋就夠了,如果做得多的話,好還是買自動(dòng)化的大容量滅菌柜。另外,平板等玻璃儀器滅菌用的烘箱一臺(tái)。儲(chǔ)存培養(yǎng)基的恒溫恒濕箱一臺(tái),用于培養(yǎng)細(xì)菌霉菌的恒溫培養(yǎng)箱各一臺(tái),有條件再多買一臺(tái)陽(yáng)性對(duì)照的專用培養(yǎng)箱。
6 各類培養(yǎng)基和革蘭氏染色的藥品。
7 平板、錐形瓶等玻璃儀器,酒精燈,平板、吸量管用的滅菌桶。
8 如果要做液體類樣品的限度的話,還需過(guò)濾器,及真空抽濾系統(tǒng)一套(儲(chǔ)水罐、真空泵)。
9 如果用到一些須先溶解再滅菌的培養(yǎng)基的話,還得準(zhǔn)備一臺(tái)電磁爐。
10 還有一些取樣用的相關(guān)器具,根據(jù)實(shí)際情況添加。